Oligo(dT)磁珠
簡(jiǎn)要描述:Oligo(dT)磁珠是一種表面共價(jià)修飾了寡聚脫氧胸苷酸(Oligo(dT))序列的磁性聚合物微球,主要用于從復(fù)雜的生物樣本中高效、特異性地分離純化真核生物的mRNA。
產(chǎn)品型號(hào):
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
更新時(shí)間:2026-03-05
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Oligo(dT)磁珠是一種表面共價(jià)修飾了寡聚脫氧胸苷酸(Oligo(dT))序列的磁性聚合物微球,主要用于從復(fù)雜的生物樣本中高效、特異性地分離純化真核生物的mRNA。
一、結(jié)構(gòu)與組成
磁核:通常以四氧化三鐵(Fe3O4)為磁核,賦予磁珠超順磁性,使其在磁場(chǎng)作用下能快速響應(yīng)并分離,移除磁場(chǎng)后無(wú)剩磁,便于操作和回收。
殼層:外面包裹一層聚合物殼層,如聚苯乙烯等,提供良好的生物相容性和化學(xué)穩(wěn)定性。
表面修飾:在聚合物殼層表面共價(jià)偶聯(lián)Oligo(dT)序列,該序列由多個(gè)脫氧胸腺嘧啶核苷酸(dT)組成,能夠特異性地與真核生物mRNA的3'端多聚腺苷酸(Poly A)尾端通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合。
二、工作原理
特異性結(jié)合:Oligo(dT)磁珠表面的Oligo(dT)序列與mRNA的Poly A尾通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式特異性結(jié)合,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)mRNA的捕獲。
磁場(chǎng)分離:在磁場(chǎng)作用下,結(jié)合了mRNA的磁珠可以快速分離,進(jìn)而獲得高純度的mRNA。
三、產(chǎn)品特點(diǎn)
高效分離:能夠快速、高效地從真核生物的總RNA、細(xì)胞裂解物或帶有Poly A的體外轉(zhuǎn)錄RNA樣本中分離出完整且高純度的mRNA。
高特異性:與mRNA的Poly A尾結(jié)合具有高特異性,能夠有效避免非特異性RNA(如rRNA、tRNA)的污染。
操作簡(jiǎn)便:純化過(guò)程通常包括磁珠預(yù)處理、樣本結(jié)合、洗滌和洗脫等步驟,所有操作均可在單管中完成,無(wú)需離心或復(fù)雜設(shè)備。
兼容性好:適配多種緩沖液體系,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整磁珠用量和洗滌條件。
穩(wěn)定性高:磁珠在4℃保存條件下穩(wěn)定性高,避免冷凍及離心操作,維持分散穩(wěn)定性。
高通量適用性:易于自動(dòng)化和規(guī)?;僮?,適用于高通量mRNA純化需求。
四、應(yīng)用場(chǎng)景
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn):純化的mRNA可直接用于逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)、固相cDNA文庫(kù)構(gòu)建、二代測(cè)序(NGS)、RACE(快速擴(kuò)增cDNA末端)、Northern Blot分析、引物延伸、基因表達(dá)分析、RNA測(cè)序、親和純化等實(shí)驗(yàn)。
疫苗開發(fā):可用于編碼抗原蛋白的mRNA疫苗制備,具有高效、安全等優(yōu)勢(shì)。
藥物篩選:通過(guò)純化mRNA,可篩選與之相互作用的分子(如蛋白質(zhì)、小分子化合物),加速藥物研發(fā)進(jìn)程。
五、注意事項(xiàng)
RNase污染控制:實(shí)驗(yàn)操作的所有器具和試劑需確保無(wú)RNase,以保證mRNA的完整性。
磁珠用量?jī)?yōu)化:磁珠用量需根據(jù)樣本量進(jìn)行優(yōu)化,用量過(guò)低可能導(dǎo)致mRNA回收率低或rRNA殘留過(guò)高。
洗脫條件優(yōu)化:洗脫時(shí)需控制好溫度和時(shí)間,以提高洗脫效率并減少磁珠殘留。
樣本質(zhì)量:若總RNA樣本降解嚴(yán)重,可能影響mRNA的純化效果,需確保樣本質(zhì)量。
儲(chǔ)存條件:磁珠應(yīng)避免冷凍保存,以免導(dǎo)致磁珠碎裂影響純化效果。通常建議在4℃條件下保存,并保持分散穩(wěn)定性。
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